Chemisches und Veterinäruntersuchungsamt Karlsruhe
Lebensmittelüberwachung und Tiergesundheit im Regierungsbezirk Karlsruhe
Nachweis von Salmonellen mittels Real-Time PCR
Die Polymerase-Ketten Reaktion, kurz PCR (Polymerase Chain Reaction) ist eine molekularbiologische Technik zur Vervielfältigung von bestimmten DNA-Abschnitten im Reagenzglas. Bei der Real-Time PCR werden die vervielfältigten DNA-Abschnitte mit fluoreszierenden Stoffen markiert, so dass man der Vervielfältigung der DNA-Abschnitte in Echtzeit zusehen kann. Dies wird an der Zunahme der Fluoreszenz gemessen.
Das CVUA Karlsruhe hat eine Real-Time PCR-Methode zum Nachweis von Mikroorganismen der Gattung Salmonella in Lebensmitteln eingeführt. Hierfür wird ein fertiger kommerzieller Testkit eingesetzt, der bereits alle benötigten Enzyme und Gensonden enthält. Die Gensonden binden spezifisch an DNA-Abschnitte, die es nur bei Salmonellen gibt.
Zum Nachweis von Salmonellen wird zunächst wie bei der klassischen Mikrobiologie eine Voranreicherung des Lebensmittels in Peptonwasser vorgenommen. Aus dem Peptonwasser wird die Salmonellen-DNA für die PCR extrahiert. Gelingt der Nachweis von Salmonellen mit der PCR, muss dieses Ergebnis noch mit der klassischen Mikrobiologie bestätigt werden. Dies dient der Absicherung des Ergebnisses und der Gewinnung der Salmonellen-Kultur für eine weitergehende Differenzierung und ggf. Typisierung. Bei salmonellennegativen Proben liegt das Ergebnis hingegen schneller vor als dies mit der zeit- und materialaufwändigen Referenzmethode möglich ist.
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